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沉香葉的抗氧化探討-Part4

2018-11-05

文獻整理 / 胖小編 / 啟動生技研發部

校閱 / 莊哲仁博士 / 美國麻省理工學院

早期在種植沉香主要以木質部收成為主，而葉子在培養過程中，常被忽略它存在的價值，久而久之就被丟棄。近年來許多學者越來越關注這副產物的經濟價值研究，例如：沉香葉抗氧化活性研究、沉香葉中抗發炎化合物研究、沉香葉抗腫瘤活性化學成分研究..等。

先前小編有分享介紹三篇關於沉香葉的抗氧化系列科研文章，這次小編想跟大家分享的是沉香葉的抗氧化試驗除了有 DPPH 自由基清除、總抗氧化能力、銅離子還原能力等方法之外，另有其他抗氧化評估方法，這次要介紹的主題也是 沉香葉提取物抗氧化活性評估 相關研究，以下就開始進入我們今天主題~~GO

📜文獻原文：Comparative Assessment of Antioxidant Activities in Aquilaria malaccensis Leaf Extracts

👨‍🏫首先來了解【沉香葉萃取該如何製備】

收集沉香的嫩葉和老葉 (Aquilaria malaccensis Leaf) → 清洗葉子表面雜質 → 室溫晾乾 → 將嫩葉和老葉一起研磨成細粉狀 → 準備萃取溶劑：水、酒精、氯仿 → 使用索氏萃取裝置進行萃取 → 將沉香葉細粉與溶劑 (比列為1:10) 放入索氏萃取管中萃取 1~2 hr → 過濾萃取樣品 → 再經旋轉蒸發儀去除溶劑，即為試驗所需的樣品 → 試驗前，先將收集的提取物保存在 4℃。

🎯 經由三種溶劑提取得到的樣品命名為：水提取物 (AQAM)，酒精提取物 (ETAM)，氯仿提取物 (CHAM)。

👨‍🏫獲得三種提取物後，【分別進行抗氧化效能測試】

作者採用 DPPH 自由基清除活性、鐵離子還原抗氧化能力 (FRAP)、捕捉過氧化氫(H2O2) 能力、超氧陰離子 (SOD) 清除能力及一氧化氮 (NO) 清除試驗，做為評估沉香葉不同溶劑提取物的抗氧化能力。

清除 DPPH 自由基的能力：

1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，簡稱 DPPH，為有機化合物，是一種穩定的自由基分子，在自由基的化學反應中作為一種監測反應的物質，為常見的體外抗氧化試驗評估方法之一。

鐵離子還原/抗氧化能力 (FRAP)：

在低 pH 條件下，利用亞鐵離子與三吡啶基三嗪 (tripyridyltriazine, TPTZ) 生成藍紫色複合物來測量樣品抗氧化能力的方法，廣泛運用于食品與保健品的抗氧化能力分析。

捕捉過氧化氫 (H2O2) 能力：

過氧化氫在波長 230 nm 時有最大吸光值，若過氧化氫與提取物反應時，若吸光值愈低，表示該提取物捕捉過氧化氫的能力愈強。

超氧自由基 (superoxide radical) 清除能力：

超氧自由基是氧化與還原反應的中間產物，具有毒性，能形成羥基自由基及過氧化氫化合物，會造成細胞受損、發炎、動脈粥狀硬化及老化現象。倘若所添加的提取物樣品能使吸光值下降，則表示該提取物具有清除超氧陰離子的能力。

一氧化氮 (NO) 抑制能力：

一氧化氮已被視為影響發炎反應及造成組織損傷之重要分子，抑制一氧化氮的生成已成為目前抗發炎防禦之一。若提取物能有效地抑制一氧化氮自由基，表示該提取物含有抗發炎活性成分存在的可能性。

表1為三種不同溶劑萃取的抗氧化活性結果顯示：

★ DPPH自由基清除活性、捕捉過氧化氫 (H2O2) 能力、超氧陰離子 (SOD) 清除能力及一氧化氮 (NO) 清除試驗均使用維他命 C 做為標準對照組。鐵離子還原抗氧化能力(FRAP) 試驗標準品使用維他命C，以維他命C 當量作為鐵離子還原抗氧化能力相對含量的表示。

★ DPPH 清除率及半抑制濃度結果：

ETAM 組有較高的清除率 (85.04 ± 0.43 %) 和較低半抑制濃度 (24.72 µg/mL)，其次為AQAM 組 > CHAM 組。

★ 捕捉過氧化氫 (H2O2) 能力及半抑制濃度結果：

ETAM 組捕捉 H2O2 能力佳及半抑制濃度較低，其次為 AQAM 組 > CHAM 組。
ETAM 組 IC50 值比對照組 (維他命C) 來的低。

★ 一氧化氮 (NO) 活性抑制能力及半抑制濃度結果：

ETAM 抑制 NO 活性較佳及半抑制濃度較低，其次為 AQAM 組 > CHAM 組。
ETAM 組 IC50 值為29 µg/mL，相當接近強抗氧化劑維他命C 對照組之半抑制濃度。

★ 超氧自由基清除能力及半抑制濃度結果：

AQAM 組 > ETAM 組 > CHAM 組。

★ 鐵離子還原/抗氧化能力 (FRAP) 結果：

ETAM 組 > AQAM 組 > CHAM 組。

🎯 經由此篇研究結果得知，使用不同極性的溶劑來萃取沉香葉都有不錯的抗氧化活性，其中以酒精提取做抗氧化效能最佳。

沉香葉的抗氧化效能是值得關注的綠鑽石💎

參考文獻：

Mahmod N.H. et al. Comparative Assessment of Antioxidant Activities in Aquilaria malaccensis Leaf Extracts. Journal of Agrobiotechnology. Vol. 8(2), 2017, p.77-85.